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化學發光免疫技術 你了解嗎?
 
 
免疫學檢測主要是利用抗原和抗體的特異性反應進行檢測的一種手段。由于其可以利用同位素、酶、化學發光物質等對其檢測信號進行放大和顯示,因此常被用于檢測蛋白質,激素等微量物質。免疫分析經歷了放射免疫檢驗,熒光免疫檢驗,酶聯免疫(ELISA)檢驗等不同時期。化學發光免疫檢驗是免疫分析發展的一個新階段,它環保快速、準確的特點已得到人們的普遍認識。因此化學發光免疫分析是通往免疫檢驗完美境界的必經之路。
 
化學發光免疫分析技術原理
化學發光免疫分析(Chemiluminesence immunoassay ,CLIA)是將化學發光或生物發光體系與免疫反應相結合,用于檢測微量抗原或抗體的一種新型標記免疫測定技術。化學發光是在常溫下由化學反應產生的光的發射。其機制為某些化合物(發光劑或發光底物)可以利用一個化學反應產生的能量使其產物分子或反應中間態分子上升至電子激態。當此產物分子或中間態分子衰退至基態時,以發射光子的形式釋放能量(即發光)。免疫測定是利用抗原抗體反應來測定標本中微量物質的方法。
 
化學發光免疫檢測原理
1.使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。
2.使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。
3.洗滌后加入發光底物,酶促使發光底物發光,通過專用的儀器檢測光子的數量,從而換算出未知抗原或抗體的濃度。
化學發光與酶免的對比
 
化學發光與酶免的對比
酶免原理
1.使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。
2.使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。
3.洗滌后加入酶反應的底物后,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺定性或定量分析。
化學發光免疫檢測的靈敏度與可測范圍遠遠高于酶免,兼具ELISA法簡便的操作方法與較短的反應時間。
化學發光與酶免的對比表
 
化學發光免疫分析的優點
1.靈敏度高:這是CLIA關鍵的優越性,其靈敏度可達 1016mol/L,化學發光底物可檢測出的堿性磷酸酶的濃度比顯色底物要靈敏五十萬倍。
2.寬的線性動力學范圍:發光強度在4-6個量級之間與測定物質濃度間呈線性關系。這與顯色的酶免疫分析吸光度(OD值)為2.0的范圍相比,優勢明顯。
3.光信號持續時間長:可達數小時甚至一天,簡化了實驗操作及測量。
4.分析方法簡便快速:絕大多數分析測定均為僅需加入一種試劑(或復合試劑)的一步模式。
5.結果穩定、誤差小:樣品系直接自己發光,不需要任何光源照射,免除了各種可能因素(光源穩定性、光散射、光波選擇器等)給分析帶來的影響,使分析結果靈敏穩定可靠。
 
 
綜合以上優點,化學發光免疫分析方法已成為臨床免疫診斷的支柱方法,普遍用于多種臨床檢驗項目的檢測,包括激素,腫瘤標志物,蛋白、病原體感染抗體等等,并且有廣闊的發展前景。
 
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